附件暂无
一．⑴．要扩增下面一段序列，请设计出其上游和下游的引物。
gcgccagtcc tccgattgac tgagtcgccc gggtacccgt gtatccaata aaccctcttg cagttgcatc cgacttgtgg
tctcgctgtt ccttgggagg gtctcctctg agtgattgac tacccgtcag cgggggtctt tcatttgggg gctcgtccgg
gatcgggaga cccctgccca gggaccaccg acccaccacc gggaggtaag ctggccagca acttatctgt
gtctgtccga ttgtctagtg tctatgactg attttatgcg cctgcgtcgg tactagttag
⑵．请给出三个提高PCR特异性的方法。
三．下图给出了一段DNA序列和其酶切位点：
BamHI SalI MspI
5’-ATCGGGATCCACTTGTCGACACCAAGCCCGG-3’
3’-TAGCCCTAGGTGAACAGCTGTGGTTCGGGCC-5’
请设计两种实验方法用放射性核素标记该段序列的上游末端。(1、简要说明原理。2、说明所用的酶。3、说明所用的放射性标记的位置。）
四．请简要说明定位克隆和同一酶切克隆有什么不同？
五.现有一个pCAT质粒和一段带有p21Promotor的DNA 序列。请设计一个试验来证明P53蛋白是否能够通过与P21的启动子作用来调节P21的表达。简要地写出操作步骤和原理。
六．写出用COBRA和MSP来检测甲基化状态的原理。
七，某蛋白质研究中心发现了一种新基因，设计实验研究该基因的功能。
八．有学者发现了Onc-1和Onc-2两种蛋白，经过酵母双杂交试验发现两种蛋白质能够相互作用。Onc-1能够调节基因FAF的表达，促进细胞增值。故而该学者推断Onc-1能够促进细胞增值，通过与Onc-2的作用调节FAF的表达。请设计实验证实该假设。
九．请简要综述基因在肝脏和大脑中组织差异性表达的关键原因。
